ATP検査用のルミノメータは、細胞培養時におけるマイコプラズマ汚染の検出に利用することができる場合があります。しかし、ATP検査自体は直接的にマイコプラズマを特定するものではなく、汚染の兆候を検出するための間接的な方法です。この記事では、ATP検査の原理、使用方法、そしてマイコプラズマ汚染が細胞に与える影響について解説します。
ATP検査とは？
ATP検査は、生物の細胞や微生物が持つATP（アデノシン三リン酸）を測定する方法です。ATPは細胞のエネルギー源であり、その量を測定することで細胞の活動状態を評価できます。ルミノメータを使用したATP測定は、細胞の数や活性を推定するために利用されます。
しかし、ATP検査は直接的にマイコプラズマを特定するわけではなく、細胞が汚染されている場合、ATPレベルが異常に高くなることを示す可能性があります。ATPが高い場合、それが細胞汚染や微生物の繁殖によるものであるかを確認する必要があります。
マイコプラズマ汚染の検出方法
マイコプラズマ汚染は、細胞培養においてよく見られる問題であり、ATP検査はその兆候を示すことができます。ATP検査を使用する場合、まずATPの量が増加しているかを測定します。増加したATPレベルは、細胞に異常が発生している可能性があることを示唆しています。
具体的な検査方法としては、ATP測定キットを使ってルミノメータで光を測定し、細胞培養のサンプルを処理することが一般的です。この際、ATPレベルが正常範囲を超えている場合、マイコプラズマ汚染の疑いが強くなります。
検査に必要な機器と準備
ATP検査を行うためには、ルミノメータの他にATP測定キットが必要です。これらのキットには、ATPを化学的に反応させて発光させる試薬が含まれており、ルミノメータを使ってその光を測定することで、ATPの量を定量化します。
また、マイコプラズマ汚染を特定するためには、ATP測定に加えて、マイコプラズマ専用のPCR（ポリメラーゼ連鎖反応）検査を行うことも推奨されます。これにより、ATPレベルが高い原因がマイコプラズマによるものかどうかを確定することができます。
マイコプラズマ汚染の細胞への影響
マイコプラズマ汚染は、細胞の増殖、継代、さらにはアポプトーシス（細胞死）にも影響を及ぼす可能性があります。マイコプラズマが細胞に感染すると、細胞の代謝や分裂が異常をきたし、培養の成績に悪影響を与えることがあります。
実際に、国立大学で行われた研究では、25%程度の細胞培養がマイコプラズマに汚染されていると報告されています。この汚染が続くと、細胞の増殖速度が遅くなったり、突然変異が生じたりするため、研究結果に誤差が生じることがあります。マイコプラズマ汚染を早期に検出し、対策を講じることが非常に重要です。
まとめ
ATP検査を使用したマイコプラズマ汚染の検出は有効な方法ですが、ATPの増加がマイコプラズマに起因するかどうかを確認するには、他の検査方法との併用が必要です。細胞培養における汚染を防ぐためには、ATP測定と併せて、専門的な検査を実施し、汚染源を特定することが大切です。
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